【摘要】：桑葉為桑科植物桑Morus alba L.的乾燥葉，
始載于《神農本草經》，
具有疏散風熱、清肺潤燥、清肝明目的功效。
桑葉中含有多糖、黃酮、生物鹼、揮發油成分、維生素、氨基酸等活性物質，
具有降血糖、降血脂、清除氧自由基等藥理活性。
桑葉中化學成分的種類與含量受種屬與種植環境條件的影響，
從而影響桑葉及其產品的品質。
為加強桑葉藥材資源的開發利用與品質控制，
本研究以高效液相色譜（HPLC）指紋圖譜結合多指標成分定量分析的方法，
對21批次不同產地桑葉藥材進行HPLC特徵指紋圖譜研究，
構建準確可靠的桑葉色譜指紋圖譜。
通過超聲波輔助提取法，
優化桑葉黃酮的最佳提取工藝，
通過試湊試驗法建立桑葉的HPLC檢測條件，
並建立了桑葉的HPLC指紋圖譜。
結合一些主要有效成分的定量檢測，
對桑葉的品質標準進行了補充和完善，
為桑葉品質控制標準提供一定的參考。
本文主要內容如下： （1）桑葉總黃酮的最佳提取工藝：桑葉中黃酮為主要的活性化學成分，
桑葉的提取條件對其含量具有較大的影響，
為提高總黃酮提取率，
系統研究了不同提取溶劑、提取方式、溫度、時間等因素對提取率的影響，
採用單因素優化、正交試驗，
優化桑葉總黃酮的提取工藝。
結果表明：以70%乙醇溶液為提取劑，
料液比為1:25（W/V），
超聲波提取2次，
每次120min為黃酮提取率最高的提取工藝。
（2）桑葉的HPLC指紋圖譜研究：本研究對採集自各地藥店的21批次桑葉進行HPLC指紋圖譜研究，
優化了色譜條件為Agilent1100型高效液相色譜儀，
二極體陣列檢測器，
Agilent TC-C18色譜柱（250mm×4.6mm，
5μm），
流動相A：0.1%磷酸水溶液，
流動相B：甲醇，
採用二元梯度洗脫程式，
0-14-28-35-50-65-70min，
15-30-40-45-60-70B%；流速：1.0mL·min-1；檢測波長340nm；柱溫25℃；進樣量10μL；方法學驗證該法建立的桑葉HPLC指紋圖譜專屬性強、穩定性好，
能比較真實全面的反映桑葉的特徵。
（3）不同批次的桑葉HPLC指紋圖譜研究：運用已建立的桑葉指紋圖譜的方法對21批次的桑葉進行分析研究，
結果顯示，
21批次桑葉共有25個共有峰，
且占所有峰面積的80%，
與黃酮標準品對照，
可確定綠原酸、蘆丁、槲皮素色譜峰。
對21批桑葉的特徵指紋圖譜進行相似度計算，
結果表明21批樣品中，
相似度均在0.70以上，
相似度最高為0.991，
相似度大於0.90的有17個樣品；相似度在0.85-0.90之間的有1個樣品；相似度小於0.85的有3個樣品。
（4）桑葉性狀觀察與主要活性成分含量分析研究：通過對不同批次桑葉進行性狀觀察，
均符合中國藥典中性狀鑒別項中描述，
但性狀對比後，
不同產地桑葉在顏色、葉片大小與薄厚、葉柄粗細等均有明顯差異；採用紫外-可見分光光度法、HPLC-DAD、HPLC-ELSD法對桑葉黃酮中綠原酸、槲皮素、蘆丁、1-去氧野尻黴素（DNJ）進行含量測定，
分析活性化學成分含量與性狀的相關性，
不同批次桑葉中各活性成分含量差異較大，
與性狀沒有明顯的關聯性，
在藥材種植期，
其氣候、土壤及採摘時間等均對藥材性狀、活性成分含量具有較大的影響。
（5）桑元止渴膠囊桑葉原藥材與中間品指紋圖譜的研究：桑元止渴膠囊為廣州軍區廣州總醫院藥學部研發的單方製劑，
已開發為軍隊醫療機構非標準製劑，
通過指紋圖譜技術對控制膠囊中間品、成品品質，
對生產工藝進行評價與規範，
也是從整體上系統控制並提高桑元止渴膠囊品質的有效途徑。
對中間品、成品的特徵指紋圖譜進行相似度計算結果表明，
膠囊製備工藝穩定可行；桑葉藥材與膠囊中間品及成品的相關性分析結果表明，
桑葉藥材中主要化學組分的色譜峰在中間品圖譜中有所體現，
膠囊製備過程中化學成分損失少，
是對成品製備提供了良好的保證。
本論文的意義在於系統的研究了不同產地桑葉的區別，
建立了可靠的分析方法，
為以桑葉為主要原料的保健產品、中藥製劑提供了良好的品質控制標準參考，
有助於桑葉藥材構效研究和藥材的全面開發。
