注射乙肝疫苗時，如針頭過小或注射部位太淺，疫苗注射到皮下不易被吸收，達不到肌肉層可形成硬結，影響免疫效果，因此應嚴格掌握注射時的注意事項，規範注射。
1、選擇合適的注射器及針頭：對發育較差、身體瘦弱的新生兒用1mL注射器較為合適，營發育好、身體肥胖者選用2.5mL注射器。
2、檢查注射器品質：打開一次性注射器後先檢查注射器的品質，拉開針栓檢查有無塑膠微粒及針栓處的橡膠微粒，發現異物及時清除或更換。
3、潤滑針管及針筒：抽吸藥液前先將針管抽動幾次，潤滑針管及針筒，防止抽藥時抽吸速度及注射時推注速度不均勻，避免不良刺激。
4、搖勻乙肝疫苗：乙肝疫苗呈乳白色，稍混懸，易沉澱，先輕輕搖勻再吸入注射器，消毒完皮膚後再次搖勻藥液後立即注射。
5、規範注射動作：注射時用力均勻，嚴格消毒局部皮膚，左手捏住上臂三角肌皮膚，右手持注射器距皮膚較近，離開皮膚少許，垂直刺入1.0cm～1.5cm。不宜將針頭直接刺入瓶底，也勿將藥液傾至瓶頸口吸藥，防止吸入沉積在瓶口處的玻璃微粒、棉花纖維等異物。
6、家屬積極配合：注射時家屬應予以配合，充分暴露被接種者注射部位，防止注射部位偏移或注射過淺造成硬結。